การย่อยแบบจำกัดทำได้โดย การฟักตัวของโมเลกุล DNA เป้าหมายที่มีข้อจำกัด เอ็นไซม์ - เอ็นไซม์ที่รับรู้และผูกลำดับดีเอ็นเอจำเพาะและแยกออกที่นิวคลีโอไทด์จำเพาะทั้งภายในลำดับการจดจำหรือภายนอก ของลำดับการจดจำ
เอนไซม์จำกัดย่อยอย่างไร
จำกัดโปรโตคอลย่อยของเอนไซม์
- เพิ่มส่วนประกอบในท่อสะอาดตามลำดับที่แสดง: …
- บ่มปฏิกิริยาที่อุณหภูมิการย่อย (ปกติ 37 °C) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง
- หยุดการย่อยอาหารด้วยการหยุดใช้ความร้อน (65 °C เป็นเวลา 15 นาที) หรือเติม EDTA ความเข้มข้นสุดท้าย 10 mM
จำกัดเอ็นไซม์ย่อย DNA หรือไม่
เอ็นไซม์จำกัดยังสามารถใช้เพื่อสร้างปลายที่เข้ากันได้ในผลิตภัณฑ์ PCR … ในทุกกรณี เอ็นไซม์จำกัดอย่างน้อยหนึ่งตัว ถูกใช้เพื่อย่อย DNA ผลลัพธ์ ในการแทรกแบบไม่มีทิศทางหรือแบบบอกทิศทางเข้าไปในพลาสมิดที่เข้ากันได้
เอ็นไซม์จำกัด DNA ทำงานอย่างไร
เอ็นไซม์จำกัดทำงานอย่างไร? เช่นเดียวกับเอนไซม์ทั้งหมด เอ็นไซม์จำกัดจะทำงาน โดยการจับคู่รูปร่างต่อรูปร่าง เมื่อสัมผัสกับลำดับดีเอ็นเอที่มีรูปร่างตรงกับส่วนหนึ่งของเอนไซม์ที่เรียกว่าไซต์การจดจำ มันพันรอบ DNA และทำให้เกิดการแตกของโมเลกุล DNA ทั้งสองเส้น
เอ็นไซม์อะไรย่อย DNA
เอ็นไซม์เหล่านี้เรียกว่า เอ็นไซม์จำกัดหรือเอ็นไซม์จำกัด และสามารถแยกโมเลกุลดีเอ็นเอที่ตำแหน่งซึ่งมีลำดับเบสสั้นๆ เฉพาะอยู่