โปรโตพลาสต์ฟิวชันทำได้โดยการเติม PEG ที่มีแคลเซียมเข้มข้นสูงที่ pH 8-10 และโดยอิเล็กโตรฟิวชั่น (Olivares-Fuster et al., 2005) โซมาติกไฮบริดเกิดจาก ฟิวชั่นของนิวเคลียสและไซโตพลาสซึมของสองสปีชีส์.
คุณหลอมรวมโปรโตพลาสต์ได้อย่างไร
โซมาติกฟิวชั่นเกิดขึ้นในสี่ขั้นตอน:
- การกำจัดผนังเซลล์ของเซลล์หนึ่งเซลล์ของพืชแต่ละประเภทโดยใช้เอนไซม์เซลลูเลสเพื่อสร้างเซลล์โซมาติกที่เรียกว่าโปรโตพลาสต์
- เซลล์จะถูกหลอมรวมโดยใช้ไฟฟ้าช็อต (อิเล็กโทรฟิวชัน) หรือการบำบัดทางเคมีเพื่อรวมเซลล์และหลอมรวมนิวเคลียสเข้าด้วยกัน
โซมาติกไฮบริไดเซชันมีขั้นตอนอย่างไร
ขั้นตอนสำคัญในเทคนิคโซมาติกไฮบริไดเซชันคือ: (1) การแยกโปรโตพลาสต์ (2) การรวมตัวของโปรโตพลาสต์ (3) การเพาะเลี้ยงโปรโตพลาสต์เพื่อเลี้ยงพืชเต็มที่, (4) การเลือกเซลล์ไฮบริดและการตรวจสอบความถูกต้องของไฮบริด Page 5 การแยกโปรโตพลาสต์ การแยกโปรโตพลาสต์ออกจากชิ้นส่วนพืชเกือบทั้งหมด เช่น …
วิธีระบุโปรโตพลาสต์ไฮบริดในโซมาติกไฮบริไดเซชัน
Somatic hybridization เป็นเทคนิคที่ช่วยให้สามารถควบคุมจีโนมของเซลล์โดยกระบวนการที่เรียกว่าโปรโตพลาสต์ฟิวชั่น เป็นการดัดแปลงพันธุกรรมพืชชนิดหนึ่งโดยที่ พืชสองสายพันธุ์ที่ต่างกันถูกหลอมรวมเข้าด้วยกัน สร้างพืชลูกผสมใหม่ที่มีลักษณะเฉพาะของทั้งสอง
อะไรทำให้เกิดการหลอมรวมของโปรโตพลาสต์ในโซมาติกไฮบริไดเซชัน
การหลอมโปรโตพลาสต์อาจเกิดขึ้นโดยสนามไฟฟ้าหรือทางเคมี โดย การเติมโพลิเอทิลีนไกลคอล 20–40% ซึ่งส่งผลให้เกิดการรวมตัวของโปรโตพลาสต์และการเจือจางของโพลีเอทิลีนไกลคอลซึ่งทำให้เกิดการหลอมรวมโปรโตพลาสต์.ต้องเลือกโซมาติกไฮบริดหลังจากการรวมโปรโตพลาสต์