เพื่อลดการจับแอนติบอดีที่ไม่เฉพาะเจาะจง และด้วยเหตุนี้ ลดสัญญาณพื้นหลัง ขอแนะนำให้ ใช้วิธีการปิดกั้นก่อนที่จะฟักตัวด้วยแอนติบอดี วิธีแก้ปัญหาการปิดกั้นที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดจะ ที่ประกอบด้วยเซรั่มจากสปีชีส์เดียวกันกับที่เลี้ยงแอนติบอดีทุติยภูมิ
ป้องกันคราบพื้นหลังอย่างไร
การลดความหนาของส่วนเนื้อเยื่อ สามารถช่วยลดการย้อมสีพื้นหลังได้ ลองตัดส่วนที่บางลงเพื่อทำความสะอาด IHC สิ่งสำคัญคือต้องดูแลไม่ให้ส่วนที่แห้งเนื่องจากการทำให้แห้งอาจส่งผลให้เกิดการย้อมสีที่ไม่เฉพาะเจาะจงสูง
คุณเพิ่มประสิทธิภาพอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์อย่างไร
Immunofluorescence Microscopy: 10 เคล็ดลับทางเทคนิคเพื่อความสำเร็จ
- การตรึงเซลล์และการซึมผ่าน …
- ความจำเพาะของแอนติบอดี …
- ใช้การเจือจางแอนติบอดีที่เหมาะสม …
- เพิ่มประสิทธิภาพบัฟเฟอร์และตัวแทนการบล็อก …
- การใช้ความหนาแน่นของเซลล์ที่เหมาะสม …
- ย้อมสีหลายชั้น. …
- แอนติบอดีรอง. …
- ลดพื้นหลัง
สิ่งที่ทำให้พื้นหลังเปื้อน
การย้อมสีพื้นหลังอาจเกิดจาก การจับแอนติบอดีที่ไม่เหมาะสมหรือเกิดจากความผิดพลาด ระหว่างการเตรียมสไลด์ทิชชู่
แอนติบอดีทุติยภูมิลดสัญญาณพื้นหลังหรือไม่
F(ab) แอนติบอดีทุติยภูมิที่จำเพาะอาจช่วยลดสัญญาณพื้นหลังโดย กำจัดการจับที่ไม่จำเพาะของ โปรตีน IgG ที่พบในเนื้อเยื่อโดยแอนติบอดีทุติยภูมิ