Logo th.boatexistence.com

จะลดการย้อมสีพื้นหลังในอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ได้อย่างไร

สารบัญ:

จะลดการย้อมสีพื้นหลังในอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ได้อย่างไร
จะลดการย้อมสีพื้นหลังในอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ได้อย่างไร
Anonim

เพื่อลดการจับแอนติบอดีที่ไม่เฉพาะเจาะจง และด้วยเหตุนี้ ลดสัญญาณพื้นหลัง ขอแนะนำให้ ใช้วิธีการปิดกั้นก่อนที่จะฟักตัวด้วยแอนติบอดี วิธีแก้ปัญหาการปิดกั้นที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดจะ ที่ประกอบด้วยเซรั่มจากสปีชีส์เดียวกันกับที่เลี้ยงแอนติบอดีทุติยภูมิ

ป้องกันคราบพื้นหลังอย่างไร

การลดความหนาของส่วนเนื้อเยื่อ สามารถช่วยลดการย้อมสีพื้นหลังได้ ลองตัดส่วนที่บางลงเพื่อทำความสะอาด IHC สิ่งสำคัญคือต้องดูแลไม่ให้ส่วนที่แห้งเนื่องจากการทำให้แห้งอาจส่งผลให้เกิดการย้อมสีที่ไม่เฉพาะเจาะจงสูง

คุณเพิ่มประสิทธิภาพอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์อย่างไร

Immunofluorescence Microscopy: 10 เคล็ดลับทางเทคนิคเพื่อความสำเร็จ

  1. การตรึงเซลล์และการซึมผ่าน …
  2. ความจำเพาะของแอนติบอดี …
  3. ใช้การเจือจางแอนติบอดีที่เหมาะสม …
  4. เพิ่มประสิทธิภาพบัฟเฟอร์และตัวแทนการบล็อก …
  5. การใช้ความหนาแน่นของเซลล์ที่เหมาะสม …
  6. ย้อมสีหลายชั้น. …
  7. แอนติบอดีรอง. …
  8. ลดพื้นหลัง

สิ่งที่ทำให้พื้นหลังเปื้อน

การย้อมสีพื้นหลังอาจเกิดจาก การจับแอนติบอดีที่ไม่เหมาะสมหรือเกิดจากความผิดพลาด ระหว่างการเตรียมสไลด์ทิชชู่

แอนติบอดีทุติยภูมิลดสัญญาณพื้นหลังหรือไม่

F(ab) แอนติบอดีทุติยภูมิที่จำเพาะอาจช่วยลดสัญญาณพื้นหลังโดย กำจัดการจับที่ไม่จำเพาะของ โปรตีน IgG ที่พบในเนื้อเยื่อโดยแอนติบอดีทุติยภูมิ