เมื่อทำสำเนาลำดับที่เพียงพอโดย PCR แล้ว electrophoresis จะถูกใช้เพื่อแยกชิ้นส่วนตามขนาด
แยกชิ้นส่วน DNA อย่างไร
เจลอิเล็กโตรโฟรีซิส เป็นเทคนิคที่ใช้ในการแยกชิ้นส่วนดีเอ็นเอ (หรือโมเลกุลขนาดใหญ่อื่นๆ เช่น RNA และโปรตีน) ตามขนาดและประจุ … โมเลกุล DNA ทั้งหมดมีประจุต่อมวลเท่ากัน ด้วยเหตุนี้ เจลอิเล็กโตรโฟรีซิสของชิ้นส่วนดีเอ็นเอจึงแยกส่วนตามขนาดเท่านั้น
แยกและแยกชิ้นส่วน DNA สำหรับลายพิมพ์ DNA ได้อย่างไร
ดีเอ็นเอที่เกิดจากการใช้เอ็นโดนิวคลีเอสที่ถูกจำกัดจะถูกแยกออก โดยเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส(i) ชิ้นส่วนดีเอ็นเอเป็นโมเลกุลที่มีประจุลบ ดังนั้นพวกมันจึงเคลื่อนเข้าหาขั้วบวกภายใต้สนามไฟฟ้าผ่านตัวกลาง … (iv) แถบ DNA ที่แยกออกจากกันถูกตัดและดึงออกจากชิ้นเจล
การแยก DNA ใช้วิธีใด
การสกัดแบบออร์แกนิก เกี่ยวข้องกับการเติมและการฟักตัวในสารละลายเคมีต่างๆ รวมถึงขั้นตอนการสลาย การสกัดฟีนอลคลอโรฟอร์ม การตกตะกอนของเอทานอล และขั้นตอนการล้าง การสกัดแบบออร์แกนิกมักใช้ในห้องปฏิบัติการเนื่องจากมีราคาถูก และให้ DNA บริสุทธิ์ในปริมาณมาก
เหตุใดจึงใช้เอทิเดียมโบรไมด์ EtBr ในเจลอิเล็กโตรโฟรีซิส
เอทิเดียม โบรไมด์ (EtBr) บางครั้งถูกเติมลงในบัฟเฟอร์การทำงานระหว่างการแยกชิ้นส่วนดีเอ็นเอด้วยอะกาโรส เจล อิเล็กโตรโฟรีซิส ใช้เพราะ เมื่อจับโมเลกุลกับ DNA และส่องสว่างด้วยแหล่งกำเนิดแสงยูวี สามารถมองเห็นรูปแบบแถบดีเอ็นเอได้
