Vortexing จะไม่ตัดอาร์เอ็นเอของคุณ เพื่อให้ใช้ไม่ได้หากคุณทำการสุ่มไพรม์ RT - เฉพาะในกรณีที่คุณต้องการโคลน mRNA แบบยาวเท่านั้น การสนับสนุนด้านเทคนิคของ Invitrogen นั้นถูกต้องเช่นกัน คลอโรฟอร์มหนักกว่า Trizol และจะจมลงสู่ก้นท่อ
กระแสน้ำวน RNA ปลอดภัยหรือไม่
ห้ามน้ำวน Trizol lysates หรือตัวอย่าง RNA เพื่อหลีกเลี่ยงการตัด หลังจากการสกัด ให้เก็บตัวอย่าง RNA ไว้บนน้ำแข็งตลอดเวลา โปรโตคอลนี้ออกแบบมาสำหรับตัวอย่างที่ละลาย Trizol 1mL ในหลอด 1.5 หรือ 2mL
ทำให้ร้อน RNA ได้ไหม
ดังนั้น หลีกเลี่ยงอุณหภูมิสูง ( สูงกว่า +65°C) เนื่องจากสิ่งเหล่านี้ส่งผลต่อความสมบูรณ์ของ RNA แทนที่จะละลายโครงสร้างทุติยภูมิ ให้ความร้อน RNA ถึง +65°C เป็นเวลา 15 นาทีต่อหน้าบัฟเฟอร์ที่ทำให้เสียสภาพ
จะระงับเม็ด RNA อย่างไร
ระงับเม็ดของคุณด้วยน้ำอุ่น (40-50 องศาเซลเซียส). ฟักในอุณหภูมิ 45 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 นาที ใส่ ใน +4 นาน 4-6 ชั่วโมง.
คุณตกตะกอน RNA อย่างไร
A.
หลังจากปรับความเข้มข้นของเกลือแล้ว RNA อาจตกตะกอนโดย เพิ่มเอทานอล 2.5 ปริมาตร หรือไอโซโพรพานอล 1 ปริมาตร แล้วผสมให้ละเอียด, ตามด้วยแช่เย็นอย่างน้อย 15 นาทีที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส