เมื่อต้องละลายเซลล์สัตว์ควรทำอย่างไร?

2024 ผู้เขียน: Fiona Howard | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2024-01-10 06:43

แนวทางการละลายเซลล์

1. ละลายเซลล์แช่แข็งอย่างรวดเร็ว (< 1 นาที) ในอ่างน้ำ 37°C
2. เจือจางเซลล์ที่ละลายอย่างช้าๆ ก่อนที่คุณจะฟักตัว โดยใช้อาหารสำหรับการเจริญเติบโตที่อุ่นไว้ล่วงหน้า
3. แผ่นเซลล์ละลายที่ความหนาแน่นสูงเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการกู้คืน
4. ใช้เทคนิคปลอดเชื้อที่เหมาะสมเสมอและทำงานในตู้ดูดควันแบบลามิเนต

ทำไมเซลล์ถึงละลาย

การละลายเซลล์อย่างถูกต้องเป็นสิ่งสำคัญเพื่อรักษาชีวิต วัฒนธรรม และทำให้วัฒนธรรมฟื้นตัวได้เร็วยิ่งขึ้น สารป้องกันความเย็นบางชนิด เช่น DMSO เป็นพิษที่อุณหภูมิสูงกว่า 4 °C ดังนั้นจึงเป็นสิ่งสำคัญที่วัฒนธรรมจะต้องละลายอย่างรวดเร็วและเจือจางในอาหารเลี้ยงเชื้อเพื่อลดผลกระทบที่เป็นพิษ

กระบวนการละลายเป็นอย่างไร

การละลายเป็น กระบวนการนำผลิตภัณฑ์แช่แข็งจากแช่แข็งไปที่อุณหภูมิ (โดยปกติสูงกว่า 0 °C) โดยที่ไม่มีน้ำแข็งตกค้าง เช่น “ละลายน้ำแข็ง” การละลายมักถูกมองว่าเป็นเพียงการพลิกกลับของกระบวนการแช่แข็ง

วิธีแช่แข็งเซลล์ที่ดีที่สุดคืออะไร

แช่แข็งเซลล์อย่างช้าๆ โดยลดอุณหภูมิลงที่ประมาณ 1°C ต่อนาที โดยใช้ตู้แช่แข็ง ควบคุมอัตราการแช่แข็ง หรือภาชนะสำหรับแช่แข็งด้วยความเย็น เช่น “Mr. Frosty” หาได้จาก Thermo Scientific Nalgene labware (Nalge Nunc) ใช้สื่อการแช่แข็งที่แนะนำเสมอ

คุณละลายเซลล์หลักอย่างไร

เช็ดด้านนอกขวดเซลล์ด้วยเอธานอล 70% หรือไอโซโพรพานอล ในตู้ความปลอดภัยทางชีวภาพ ให้บิดฝาหนึ่งส่วนสี่รอบเพื่อลดแรงกดภายในแล้วขันให้แน่น ละลายเซลล์อย่างรวดเร็ว ในอ่างน้ำ 37°C โดยหมุนขวดเบาๆนำขวดออกเมื่อมีน้ำแข็งเหลืออยู่เล็กน้อย