การเสริมฟลูออเรสเซนซ์แบบสองโมเลกุลในร่างกาย?

2024 ผู้เขียน: Fiona Howard | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2024-01-10 06:43

การทดสอบ Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) คือ วิธีการที่ใช้ในการแสดงภาพปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนกับโปรตีนโดยตรงในร่างกายโดยใช้ การถ่ายภาพในเซลล์ที่มีชีวิตหรือเซลล์ตายตัว … BiFC ถูกบรรยายครั้งแรกโดย Hu et al.

การเสริมสารเรืองแสงสองโมเลกุลทำงานอย่างไร

หลักการทำงานของ BiFC ขึ้นอยู่กับการพัฒนาของสารเชิงซ้อนเรืองแสง ซึ่งเป็นผลมาจากการเชื่อมโยงกันของโปรตีนเรืองแสงสองส่วนเมื่อพวกมันอยู่ใกล้กันอันเนื่องมาจากปฏิสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนกับโปรตีนในชิ้นส่วน เช่น ใน BiFC ฟลูออโรฟอร์แบ่งออกเป็นปลายขั้วอะมิโนและคาร์บอกซิล

การทดสอบ BiFC คืออะไร

การเสริมการเรืองแสงสองโมเลกุล (BiFC) ช่วยให้มองเห็นปฏิสัมพันธ์ของโปรตีนในเซลล์ที่มีชีวิตได้ง่ายและตรงไปตรงมา (45)แนวทาง BiFC ขึ้นอยู่กับการก่อตัวของสารเชิงซ้อนเรืองแสงเมื่อโปรตีนสองชนิดหลอมรวมกับชิ้นส่วนที่ไม่เรืองแสงของโปรตีนเรืองแสงมีปฏิสัมพันธ์ซึ่งกันและกัน (รูปที่

ทำไมการทดสอบ BiFC จึงเสร็จสิ้น

แนวคิดของ BiFC คือ เพื่อแสดงครึ่งหนึ่งของ GFP ที่หลอมรวมกับโปรตีนที่คุณสนใจ หาก POI โต้ตอบกัน คุณสามารถนำทั้งสองส่วนมารวมกันเพื่อรับ GFP ที่ใช้งานได้ ดังนั้นหากมี GFP ครึ่งหนึ่งแสดงอยู่ในเซลล์ ฉันไม่แปลกใจเลยที่แอนติบอดี GFP สามารถตรวจพบได้

BiFC ย้อนกลับได้หรือไม่

การย้อนกลับไม่ได้ของสารเชิงซ้อน BiFC ได้รับการบันทึกไว้อย่างดี (10) และดูเหมือนว่าส่วนใหญ่ ถ้าไม่ใช่ทั้งหมด โปรตีนเรืองแสง- based BiFC ระบบกลับไม่ได้ (8, 33, 43, 48–51).