ใช้แอมโฟไลต์ เพื่อสร้างการไล่ระดับ pH ภายในเส้นเลือดฝอย และโปรตีนที่จะแยกย้าย (หรือถูกโฟกัส) ผ่านสื่อแอมโฟไลต์จนกว่าพวกเขาจะไม่มีประจุที่ pI ค่า.
เหตุใดจึงใช้แอมโฟไลต์ใน IEF
ใน IEF แอมโฟไลต์ เดินทางตามประจุภายใต้อิทธิพลของสนามไฟฟ้า ต่อหน้า pH ไล่ระดับ จนกระทั่งประจุสุทธิของโมเลกุลเป็นศูนย์ (เช่น จุดไอโซอิเล็กทริก พีไอ) … แม้แต่แอมโฟไลต์ที่ง่ายที่สุด (เช่น กรดอะมิโน) ก็สามารถสร้างระดับ pH และทำหน้าที่เป็นบัฟเฟอร์ไอโซอิเล็กทริกได้
เหตุใดจุดไอโซอิเล็กทริกจึงสำคัญ
จุดไอโซอิเล็กทริกมีความสำคัญในการทำให้โปรตีนบริสุทธิ์เพราะว่า แสดงถึง pH ซึ่งโดยทั่วไปแล้วความสามารถในการละลายมีน้อย … พอลิเมอร์นี้มีคุณสมบัติเฉพาะตัวเพื่อให้แน่ใจว่าโปรตีนจะสร้างระดับ pH ไล่ระดับเมื่อคุณใช้สนามไฟฟ้าในสารละลาย
แอมโฟไลต์สร้างการไล่ระดับ pH ได้อย่างไร
ใน CIEF การไล่ระดับ pH ที่ต่างกันจะถูกสร้างขึ้น ภายในเส้นเลือดฝอยโดยใช้แรงดันไฟฟ้าผ่านแอมโฟไลต์ของพาหะ ความกว้างของการไล่ระดับ pH ขึ้นอยู่กับชุดของแอมโฟไลต์ที่เลือก แอมโฟไลต์มีจำหน่ายในเชิงพาณิชย์เพื่อให้ครอบคลุมช่วง pH ทั้งแบบกว้างและแบบแคบ ดังแสดงในรูปที่ 5.2.
เคมีแอมโฟไลต์คืออะไร
แอมโฟไลต์คือ สารประกอบที่เมื่อละลายในน้ำ (ซึ่งเป็นสารประกอบแอมโฟเทอริก) สามารถทำหน้าที่เป็นกรดหรือเป็นเบสได้