เป็นไพรเมอร์เดินหน้าและถอยหลังหรือไม่?

2024 ผู้เขียน: Fiona Howard | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2024-01-10 06:43

ไพรเมอร์เป็นลำดับสั้นๆ ของ DNA สายเดี่ยวที่ทำเครื่องหมายปลายทั้งสองของลำดับเป้าหมาย … ไพรเมอร์ forward ยึดติดกับโคดอนเริ่มต้นของ DNA แม่แบบ(สายต้านความรู้สึก) ในขณะที่ไพรเมอร์ย้อนกลับยึดติดกับโคดอนหยุดของสายเสริมของ DNA (สายประสาทสัมผัส).

ไพรเมอร์เดินหน้าและถอยหลังเหมือนกันหรือไม่

ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างไพรเมอร์ไปข้างหน้าและย้อนกลับคือ ไพรเมอร์ไปข้างหน้าหลอมรวมแอนติเซนส์ สาระของ DNA แบบสองเกลียวซึ่งวิ่งจากทิศทาง 3′ ถึง 5′ ในขณะที่ ไพรเมอร์แบบย้อนกลับจะหลอมเข้ากับสายประสาทสัมผัสของ DNA แบบสองสาย ซึ่งไหลจากทิศทาง 5′ ถึง 3′

คุณต้องการไพรเมอร์เดินหน้าและถอยหลังสำหรับ PCR หรือไม่

เนื่องจาก DNA เกลียวคู่ คุณจึงต้องมีทั้งไพรเมอร์ไปข้างหน้าและถอยหลัง สมมติว่าคุณใช้ไพรเมอร์เพียงตัวเดียว เช่น ไพรเมอร์ไปข้างหน้า ดังนั้นในระหว่าง PCR มันจะผูกกับเกลียวไปข้างหน้าเท่านั้นและการขยายของเกลียวกลับจะเกิดขึ้น

ซ้ายไพรเมอร์ไปข้างหน้าหรือถอยหลัง

forward ลำดับของไพรเมอร์ ('Left Primer') เหมือนกันกับลำดับของสายอ้างอิง และดังนั้นจึงผูกติดกับสายเสริม (TAACTCCACCATTAGCACCC แสดงอยู่ในตำแหน่งด้านล่างสายเสริม).

รีเวิร์สไพรเมอร์และไพรเมอร์เดินหน้าคืออะไร

ไพรเมอร์เป็นลำดับสั้นๆ ของ DNA สายเดี่ยวที่ทำเครื่องหมายปลายทั้งสองของลำดับเป้าหมาย … forward primer ติดกับ start codon ของ template DNA (สาย anti-sense) ในขณะที่ reverse primer ยึดติดกับ codon หยุดของสายเสริมของ DNA (sense strand).