สารบัญ:
- เกิดอะไรขึ้นในเฟสย้อนกลับ HPLC
- เฟสแบบอยู่กับที่และแบบเคลื่อนที่ใน HPLC แบบย้อนกลับคืออะไร
- เหตุใดจึงแนะนำให้ใช้ HPLC แบบย้อนกลับเฟส
- HPLC เฟสปกติและเฟสย้อนกลับต่างกันอย่างไร
2024 ผู้เขียน: Fiona Howard | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2024-01-10 06:43
คำว่า reversed-phase อธิบายโหมดโครมาโตกราฟีที่ ตรงข้ามกับเฟสปกติ คือการใช้เฟสเคลื่อนที่แบบมีขั้วและแบบไม่มีขั้ว [ไม่ชอบน้ำ] เฟส. … ซิลิกาพันธะ C18 [บางครั้งเรียกว่า ODS] เป็นบรรจุภัณฑ์ HPLC แบบย้อนกลับเฟสที่ได้รับความนิยมมากที่สุด
เกิดอะไรขึ้นในเฟสย้อนกลับ HPLC
โครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับใช้เฟสเคลื่อนที่แบบมีขั้ว (น้ำ) ด้วยเหตุนี้ โมเลกุลที่ไม่ชอบน้ำในเฟสเคลื่อนที่ของขั้วโลกจึงมีแนวโน้มที่จะดูดซับไปยังเฟสที่อยู่กับที่ที่ไม่ชอบน้ำ และ โมเลกุลที่ชอบน้ำในเฟสเคลื่อนที่จะผ่านคอลัมน์ และถูกชะออกก่อน
เฟสแบบอยู่กับที่และแบบเคลื่อนที่ใน HPLC แบบย้อนกลับคืออะไร
ในโครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับซึ่งเป็นรูปแบบทั่วไปของ HPLC เฟสอยู่กับที่ไม่เป็นขั้วและเฟสเคลื่อนที่มีขั้ว.
เหตุใดจึงแนะนำให้ใช้ HPLC แบบย้อนกลับเฟส
โครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับให้ สามารถละลายได้ดีกว่าสำหรับตัววิเคราะห์เชิงขั้ว ใช้ตัวทำละลายที่ไม่เป็นพิษ เสนอวิธีการสำหรับการกำจัดสารปนเปื้อนและสารเติมแต่งเฟสเคลื่อนที่ และให้ตัวอย่างที่ทันเวลาด้วยตัวทำละลายเพียงเล็กน้อย การระเหย
HPLC เฟสปกติและเฟสย้อนกลับต่างกันอย่างไร
ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างเฟสย้อนกลับและเฟสปกติ HPLC คือ เฟสย้อนกลับ HPLC ใช้เฟสอยู่กับที่แบบไม่มีขั้วและเฟสเคลื่อนที่แบบมีขั้ว ในขณะที่ HPLC เฟสปกติใช้แบบมีขั้ว เฟสและเฟสเคลื่อนที่ที่มีขั้วน้อยกว่า
แนะนำ:
ทำไมการกำจัดแก๊สจึงสำคัญใน hplc?
การดีแก๊สแบบออนไลน์มีความสำคัญเมื่อทำ HPLC, FPLC, GPC และ uHPLC เพราะการกำจัดแก๊สจะขจัดก๊าซที่ละลายออกดังนั้นจึงหลีกเลี่ยงการก่อตัวของฟองสบู่ … การผสมด้วยแรงดันต่ำ: ระบบมีแนวโน้มที่จะเกิดฟองสบู่มากขึ้น รูปแบบ. ตัวทำละลายที่ใช้สำหรับเฟสเคลื่อนที่จะถูกผสมก่อนปั๊ม ทำไมการกำจัดแก๊สจึงสำคัญ การไล่แก๊สเป็นขั้นตอนสำคัญหลังผสม (บางครั้งต้องไล่แก๊สออกหลังจากการหล่อด้วย) เพื่อขจัดรูขุมขนที่ตกค้างในสารละลาย รูขุมขนเหล่านี้สามารถใช้ได้ทั้งในระหว่างการผสมหรือปฏิกิริยาเคมี หรืออา
ใน hplc ซึ่งตัวทำละลายใช้?
โดยส่วนใหญ่ คือ HPLC น้ำเกรด (Mili Que), เมทานอล, อะซิโตน, เบนซิน, อะซิโตไนไทรล์, คลอโรฟอร์ม และปิโตรเลียม อีเธอร์ . ของเหลวชนิดใดที่ใช้ใน HPLC อนุภาคที่ดูดซับอาจไม่ชอบน้ำหรือมีขั้วในธรรมชาติ เฟสเคลื่อนที่ทั่วไปที่ใช้รวมถึงการผสมผสานของน้ำกับตัวทำละลายอินทรีย์ต่างๆ (โดยทั่วไปคือ acetonitrile และเมทานอล) เทคนิค HPLC บางอย่างใช้โมบายเฟสแบบไม่ใช้น้ำ (ดูโครมาโตกราฟีแบบเฟสปกติด้านล่าง) ตัวทำละลายเกรด HPLC คืออะไร ตัวทำละลายเกรด HPLC คือ เตรียมโดยกระบวนการกลั่นเพื
ทำไมเวลาเก็บรักษาใน hplc จึงเปลี่ยนไป
ที่เกี่ยวข้องกับปรากฏการณ์สุดท้ายคือการเปลี่ยนแปลงของเวลาการเก็บข้อมูลซึ่งเกิดจาก โดยความดันย้อนกลับที่เพิ่มขึ้นในคอลัมน์ แรงดันย้อนกลับที่เพิ่มขึ้นอาจบ่งบอกถึงการปนเปื้อนของคอลัมน์ แต่แม้กระทั่งฟริตที่อุดตันก็อาจส่งผลต่อเวลาการกักเก็บ อะไรทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงเวลาเก็บรักษา สาเหตุที่พบบ่อยที่สุดประการหนึ่งของการเปลี่ยนแปลงเวลาการกักเก็บในการแยก LC แบบย้อนกลับเฟสคือ การเปลี่ยนแปลงเล็กน้อยในความเข้มข้นของตัวทำละลายอินทรีย์ ซึ่งมักจะเป็นเมทานอลหรืออะซีโตไนไทรล์ กระป๋
อะไรจะละลายก่อนในเฟสย้อนกลับ hplc?
ใน HPLC แบบย้อนกลับ ลำดับของการชะจะตรงกันข้ามกับการแยกในเฟสปกติ โดยที่ มีขั้วตัวละลายมากกว่าก่อน การเพิ่มขั้วของเฟสเคลื่อนที่ทำให้มีเวลาเก็บรักษานานขึ้น สารประกอบใดจะละลายก่อนในการแยก HPLC เฟสย้อนกลับ โครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับใช้เฟสเคลื่อนที่แบบมีขั้ว (น้ำ) ด้วยเหตุนี้ โมเลกุลที่ไม่ชอบน้ำในเฟสเคลื่อนที่ของขั้วโลกจึงมีแนวโน้มที่จะดูดซับไปยังเฟสคงที่ที่ไม่ชอบน้ำ และ โมเลกุลที่ชอบน้ำในระยะเคลื่อนที่ จะผ่านคอลัมน์และถูกชะออกก่อน สารประกอบใดละลายก่อนใน HPLC วิเคร
