ริปาบัฟเฟอร์สามารถแช่แข็งได้หรือไม่?

2024 ผู้เขียน: Fiona Howard | [email protected]. แก้ไขล่าสุด: 2024-01-10 06:43

หนึ่งสามารถแช่แข็ง และละลายบัฟเฟอร์ RIPA ได้ 2-3 ครั้งโดยไม่สูญเสียประสิทธิภาพตราบใดที่มันถูกเก็บไว้ในน้ำแข็งระหว่างการใช้งาน (20-30 นาที) เก็บบัฟเฟอร์แช่แข็งที่อุณหภูมิ -80 องศาเซลเซียส

ฉันสามารถเก็บบัฟเฟอร์ RIPA ได้นานแค่ไหน

1. หากจะใช้บัฟเฟอร์อย่างต่อเนื่อง ขอแนะนำให้เก็บบัฟเฟอร์ 10x ไว้ที่ 4°C เป็นเวลา 1-2 สัปดาห์ ควรเก็บบัฟเฟอร์ไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสเป็นระยะเวลานาน แนะนำให้ใช้การแบ่งบัฟเฟอร์ 10x หากต้องทำการทดลองเล็กๆ จำนวนมาก

เก็บบัฟเฟอร์ RIPA ได้ที่

บัฟเฟอร์ RIPA ที่เตรียมไว้ควรแบ่งเป็นส่วนๆ และเก็บไว้ที่ −20°C. เพิ่มโปรตีเอสและ/หรือสารยับยั้งฟอสฟาเตสลงในส่วนลิโควตที่ละลายแล้วก่อนนำไปใช้ทันที บัฟเฟอร์หนึ่งมิลลิลิตรเพียงพอที่จะสลายเซลล์ได้ประมาณ 5 ล้านเซลล์ …

คุณเก็บ RIPA lysates อย่างไร

ใช้ไลเสตที่เตรียมไว้ให้เร็วที่สุดและเก็บไว้ให้สั้นที่สุด เก็บไลเซท at -80℃ ให้นานที่สุด สำหรับไลเซทที่ต้องเก็บไว้ในระยะยาว ให้ย้ายหลอดที่เตรียมไว้ใหม่ไปยังช่องแช่แข็ง -80℃ ที่มีอยู่เพื่อป้องกันการเสื่อมสภาพ

คุณละลายบัฟเฟอร์ RIPA อย่างไร

หลังจากนำน้ำยาล้างขั้นสุดท้ายออกจากเซลล์แล้ว ให้เติมบัฟเฟอร์ RIPA ในปริมาณที่เหมาะสม (1 มล. ต่อ 0.5 ถึง 5 × 107 เซลล์) ลงในเม็ดเซลล์ และผสมหรือผสมหรือกระแสน้ำวนชั่วครู่เพื่อระงับเซลล์ใหม่ทั้งหมด ฟักไข่บนน้ำแข็งหรือในตู้เย็น (2–8 °C) เป็นเวลาห้านาที